ความบริสุทธิ์ของน้ำส่งผลต่อผลลัพธ์โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงอย่างไร

คุณเพิ่งใช้วิธีไล่ระดับสีซึ่งทำงานได้อย่างสมบูรณ์แบบเมื่อสัปดาห์ที่แล้ว มาตรฐานการสอบเทียบดูสะอาดตา แต่โครมาโตกราฟีตัวอย่างแสดงจุดสูงสุดพิเศษที่ 23.8 นาที คุณเปลี่ยนคอลัมน์ เตรียมบัฟเฟอร์ใหม่ และตรวจสอบเครื่องตรวจจับ ยอดยังอยู่ครับ จากนั้นคุณเปลี่ยนน้ำเข้าสู่ระยะเคลื่อนที่ และสิ่งประดิษฐ์จะหายไป นั่นคือความเป็นจริงของโครมาโทกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง: ความบริสุทธิ์ของน้ำอยู่ภายใต้การแยกทุกครั้ง และเมื่อมีการเปลี่ยนแปลง วิธีการก็จะเปลี่ยนไปตามไปด้วย

ความบริสุทธิ์ของน้ำส่งผลต่อคุณภาพข้อมูล HPLC ในทางปฏิบัติสี่วิธี ได้แก่ ความเสถียรของเส้นพื้นฐาน รูปร่างสูงสุด ความสามารถในการทำซ้ำของการเก็บรักษา และอายุการใช้งานของเครื่องมือ สารปนเปื้อนที่เกี่ยวข้องอาจเป็นโมเลกุลอินทรีย์ ไอออนที่ละลาย อนุภาค หรือจุลินทรีย์ สิ่งเจือปนประเภทหนึ่งแม้แต่ปริมาณเล็กน้อยก็สามารถให้ผลที่ตามมาจากความเข้มข้นของสารนั้นได้

ผลกระทบหลักของความบริสุทธิ์ของน้ำต่อ HPLC

ในระบบ HPLC น้ำคือตัวทำปฏิกิริยา ไม่ใช่พื้นหลังแบบพาสซีฟ โดยจะบรรทุกบัฟเฟอร์ ละลายตัวอย่าง และมีส่วนทำให้เกิดพื้นหลังของเครื่องตรวจจับ สิ่งเจือปนในน้ำจึงเคลื่อนเข้าสู่สัญญาณการวิเคราะห์โดยตรง ตารางด้านล่างสรุปสารปนเปื้อนที่พบบ่อยที่สุดและผลกระทบ

ผลกระทบเหล่านี้ไม่ได้เป็นเพียงแต่ในทางทฤษฎีเท่านั้น แผ่นชีวะของจุลินทรีย์ในอ่างเก็บน้ำสามารถปล่อยสารที่ดูดซับรังสียูวีได้ และเมื่อฟิล์มก่อตัวขึ้น การเปลี่ยนน้ำเพียงอย่างเดียวอาจไม่ช่วยแก้ปัญหาได้จนกว่าอ่างเก็บน้ำจะได้รับการทำความสะอาดและฆ่าเชื้อ

จริงๆ แล้ว "เกรด HPLC" และน้ำประเภท 1 หมายถึงอะไร

วิธีการวิเคราะห์ส่วนใหญ่จะต้องใช้น้ำที่ตรงตามข้อกำหนดประเภท 1 ในทางปฏิบัติ นั่นหมายความว่าค่าความต้านทานที่ 25 องศาเซลเซียสจะอยู่ที่ประมาณ 18.2 เมกะโอห์ม-เซนติเมตร ค่าการนำไฟฟ้าอยู่ใกล้ๆ 0.055 ไมโครซีเมนส์ต่อเซนติเมตร และอินทรีย์คาร์บอนทั้งหมดต่ำพอที่จะทำให้น้ำไม่สร้างพื้นหลังของ UV หรือ MS ที่มองเห็นได้ ความต้านทานเพียงอย่างเดียวไม่เพียงพอ คุณยังจำเป็นต้องทราบระดับ TOC จำนวนอนุภาค และค่าซิลิเกตหรือโซเดียมในการใช้งานบางอย่างด้วย

ค่า pH ของน้ำบริสุทธิ์ไม่ใช่ข้อกำหนดเฉพาะที่เป็นประโยชน์ น้ำบริสุทธิ์พิเศษแทบไม่มีความสามารถในการบัฟเฟอร์ และดูดซับคาร์บอนไดออกไซด์จากอากาศได้อย่างรวดเร็ว ดังนั้นค่า pH ที่วัดได้ประมาณ 5.6 จะสะท้อน CO2 ที่ละลายในน้ำเท่านั้น ค่า pH ที่สำคัญคือค่า pH ของเฟสเคลื่อนที่ที่ถูกบัฟเฟอร์ที่คุณเตรียมไว้

ข้อกำหนดด้านคุณภาพน้ำยังขึ้นอยู่กับเครื่องตรวจจับด้วย การตรวจจับรังสียูวีที่ 210 นาโนเมตรมีความไวต่อการปนเปื้อนสารอินทรีย์เป็นพิเศษ เนื่องจากมีพันธะคาร์บอน-ออกซิเจน และคาร์บอน-ไนโตรเจนจำนวนมากดูดซับอยู่ที่นั่น LC-MS ต้องการน้ำที่มีความเจือปนที่ไม่ลบเลือนต่ำมากเพื่อหลีกเลี่ยงการยับยั้งไอออนและการก่อตัวของสาร adduct เครื่องตรวจจับการระเหยจะได้รับผลกระทบจากการปนเปื้อนแบบไม่ลบเลือนเช่นเดียวกัน เนื่องจากจะส่งสัญญาณพื้นหลังให้สูงขึ้น น้ำประเภท 1 จึงเป็นจุดเริ่มต้นที่ดีสำหรับการใช้งาน HPLC เกือบทุกประเภท

น้ำบรรจุขวดเกรด HPLC สามารถทำงานได้ แต่ต้องจัดเก็บและจัดการอย่างถูกต้อง ตรวจสอบใบรับรองการวิเคราะห์ บันทึกหมายเลขล็อต และอย่าคิดว่าภาชนะเก่าไม่มีการเจริญเติบโตทางชีวภาพ

การชะล้างแบบไล่ระดับทำให้มองเห็นสิ่งสกปรกในน้ำได้

สิ่งเจือปนของน้ำจะมองเห็นได้มากที่สุดในวิธีการไล่ระดับ ในการทำงานแบบ isocratic สารปนเปื้อนที่ดูดซับรังสียูวีอาจทำให้ค่าพื้นฐานเพิ่มขึ้นเล็กน้อย ในการไล่ระดับ เศษส่วนของน้ำเริ่มต้นสูงและเศษส่วนของตัวทำละลายอินทรีย์จะเพิ่มขึ้นเมื่อเวลาผ่านไป สารปนเปื้อนสามารถเก็บไว้ที่ส่วนหัวของคอลัมน์แล้วชะล้างเมื่อมีปริมาณอินทรียวัตถุเพิ่มขึ้น สิ่งนี้ทำให้เกิดจุดสูงสุดและเส้นฐานแบบเลื่อนลอยที่อาจรบกวนการรวมและการหาปริมาณ

นั่นคือเหตุผลว่าทำไมการไล่ระดับที่ว่างเปล่าจึงเป็นหนึ่งในการตรวจสอบคุณภาพน้ำที่ง่ายที่สุด รันการไล่ระดับสีที่แน่นอนโดยไม่ต้องฉีดตัวอย่าง หากจุดสูงสุดปรากฏขึ้นในช่องว่าง แสดงว่าสงสัยว่าเป็นช่วงเคลื่อนที่

นิสัยประจำวันที่ปกป้องความบริสุทธิ์ของน้ำ

น้ำบริสุทธิ์ไม่ได้บริสุทธิ์โดยบังเอิญ นิสัยต่อไปนี้ป้องกันปัญหาที่พบบ่อยที่สุดในการฝึก HPLC

• ใช้น้ำจากระบบกรองน้ำด้วยตลับหมึกใหม่ หลอด UV ที่ใช้งานได้ และการฆ่าเชื้ออย่างสม่ำเสมอ
• เก็บน้ำใส่ภาชนะที่สะอาดและมีฝาปิด อย่าเปิดคอนเทนเนอร์ทิ้งไว้ในขณะที่ระบบทำงาน
• อย่าเก็บน้ำไว้เป็นเวลาหลายวัน เตรียมระยะเคลื่อนที่ด้วยน้ำสะอาดในวันเดียวกันทุกครั้งที่เป็นไปได้
• หลีกเลี่ยงการเติมน้ำจืดลงในอ่างเก็บน้ำที่เต็มไปบางส่วน เปลี่ยนเนื้อหาในอ่างเก็บน้ำแทนการเติมให้เต็ม
• เรียกใช้การไล่ระดับสีว่างที่ความยาวคลื่นที่ใช้ในการวิเคราะห์และบันทึกผลลัพธ์
• บันทึกค่าความต้านทาน, TOC และวันที่รวบรวมน้ำไว้ในบันทึกการวิเคราะห์ของคุณ

สำหรับห้องปฏิบัติการที่ใช้น้ำดื่มบรรจุขวด จะใช้กฎเดียวกัน ตรวจสอบวันหมดอายุ ปิดภาชนะทันทีหลังใช้งาน และอย่านำน้ำที่ไม่ได้ใช้จากบีกเกอร์กลับคืนสู่ขวด

สารเติมแต่งเปลี่ยนปัญหาน้ำให้เป็นปัญหาวิธีการ

เฟสเคลื่อนที่ไม่ค่อยมีน้ำเพียงอย่างเดียว เกลือบัฟเฟอร์ กรด รีเอเจนต์ไอออนคู่ และตัวดัดแปลงพิเศษบางชนิดจะถูกเติมที่ความเข้มข้นที่ค่อนข้างต่ำ หากน้ำมีสิ่งเจือปนที่ดูดซับ UV สิ่งสกปรกเหล่านั้นอาจไม่เปลี่ยนความจุบัฟเฟอร์ แต่ยังคงปรากฏในสัญญาณของเครื่องตรวจจับ

บางครั้งของเหลวไอออนิกถูกใช้เป็นตัวปรับเฟสแบบเคลื่อนที่เพื่อปรับปรุงรูปร่างหรือความสามารถในการคัดเลือกสูงสุด เมื่อคุณเลือกอย่างใดอย่างหนึ่ง ควรใช้มาตรฐานความบริสุทธิ์เดียวกัน ตัวอย่างเช่น 1-เอทิล-3-เมทิลอิมิดาโซเลียม เตตระฟลูออโรบอเรต เป็นของเหลวไอออนิกทั่วไปสำหรับการศึกษาโครมาโตกราฟี ควรละลายในน้ำที่ตรงตามข้อกำหนดประเภท 1 แล้ว มิฉะนั้นสารเติมแต่งจะกลายเป็นแหล่งปนเปื้อนอีกแหล่งหนึ่ง หากคุณต้องการทำความเข้าใจคุณสมบัติที่เกี่ยวข้องกับการแยกสารของสารประกอบเหล่านี้ โปรดดูของเรา ภาพรวมการทำงานของของเหลวไอออนิกในกระบวนการแยก ครอบคลุมตัวแปรเชิงปฏิบัติ

CAS:143314-16-3 -1 -Ethyl-3-methylimidazolium Tetrafluoroborate ผู้จัดจำหน่ายของเหลว เทคโนโลยี Ldet คือจีนที่กำหนดเอง CAS: 143314-16-3 -1 -Ethyl-3-methylimidazolium Tetrafluoroborate ซัพพลายเออร์ของเหลวและ 1 -Ethyl-3-methylim ... ดูผลิตภัณฑ์ →

ความบริสุทธิ์เริ่มต้นจากซัพพลายเออร์

ที่ Zhejiang Ldet เราผลิตของเหลวไอออนิกและสารเคมีชนิดพิเศษ เราทราบจากการผลิตว่าสิ่งเจือปนเล็กน้อยในวัสดุตั้งต้นสามารถเปลี่ยนประสิทธิภาพการทำงานขั้นปลายน้ำได้ นั่นคือเหตุผลที่เราตรวจสอบปริมาณน้ำ เฮไลด์ที่ตกค้าง และพฤติกรรมของรังสียูวีก่อนปล่อยออก ระเบียบวินัยเดียวกันนี้อยู่ในห้องปฏิบัติการ HPLC: เลือกวัสดุที่มาพร้อมกับข้อกำหนดจำเพาะที่เป็นเอกสาร ตัวอย่างเช่น 1-บิวทิล-3-เมทิลอิมิดาโซเลียม เตตระฟลูออโรบอเรต มาพร้อมกับข้อมูลความบริสุทธิ์ที่ช่วยให้คุณประเมินได้ว่าเข้ากันได้กับวิธีการตรวจจับของคุณหรือไม่

CAS: 174501-65-6-1-Butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate ซัพพลายเออร์ของเหลว เทคโนโลยี Ldet เป็น CAS ที่กำหนดเองของจีน: 174501-65-6-1-Butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate ซัพพลายเออร์ของเหลวและ 1-Butyl-3-methylimid... ดูผลิตภัณฑ์ →

สิ่งที่ต้องตรวจสอบในใบรับรองการวิเคราะห์

• ปริมาณเฮไลด์ตกค้าง เนื่องจากเฮไลด์อาจส่งผลต่อการแยกตัวของการแลกเปลี่ยนไอออนและการกัดกร่อน
• ปริมาณน้ำ เนื่องจากน้ำเปลี่ยนความเข้มข้นที่มีประสิทธิผลของสารเติมแต่ง
• สเปกตรัม UV หรือการตัดแสง UV เพื่อให้คุณสามารถคาดการณ์การดูดกลืนแสงพื้นหลังได้
• ความสม่ำเสมอของล็อตต่อล็อต เนื่องจากล็อตใหม่ไม่ควรเปลี่ยนวิธีการของคุณโดยไม่ได้ตั้งใจ

หากคุณต้องการความช่วยเหลือในการจับคู่วัสดุกับวิธีการ คุณสามารถทำได้ หารือเกี่ยวกับข้อมูลความบริสุทธิ์และข้อกำหนดที่กำหนดเองกับทีมเทคนิคของเรา .

บำบัดน้ำเป็นส่วนหนึ่งของวิธีการ

ความบริสุทธิ์ของน้ำใน HPLC ไม่ใช่การตั้งค่าเพียงครั้งเดียว เป็นตัวแปรรายวันที่สามารถเปลี่ยนแปลงได้ตามฤดูกาล ขวดเก็บ และสภาพของระบบการทำให้บริสุทธิ์ ใช้น้ำประเภท 1 ยืนยัน TOC และความต้านทาน จัดการอย่างเหมาะสม และเลือกสารเติมแต่งที่สามารถตรวจสอบย้อนกลับได้ ในวิธีการที่สร้างขึ้นจากสารวิเคราะห์ระดับนาโนกรัม น้ำไม่เคยเป็น "แค่น้ำ"